达芬奇在工房学习技艺的时候，表现出了非凡的绘画天才。大约1470年，协助维罗基奥画《耶稣的洗礼》的时候，只画了跪在耶稣身边的天使，但是他的表情、表情、柔和的色调明显超过了维罗基奥。据说维罗基为了那个不画画。现存的他的第一部作品《受胎通知》是达芬奇在没有老师的指导下独立完成的作品。除了自由的构思之外，这幅画的场景是达芬奇按照一般的透视画法构思的。
之后，位于奥利维特峰的圣帕特罗梅奥修道院订购了这部作品，之后创作的《几内维拉·班克》，以15世纪的艺术追求线条清晰的传统，再现了以逆光夕照的色调提倡的透视效果。1481年创作的《博士来拜》是一部艺术风格达到成熟期的作品。

这幅画因为他出发去米兰所以没有完成，但是从原稿上可以看到构图和形象形成所显示的艺术革新，大大超过了他的老师和同时代：圣母的婴儿和三个博士所形成的三角形的稳定构图、用正确的透视法描绘的建筑遗迹和飞跃性的马群等背景说明了他从叙事的角度不轻易罗列有关人物了。他采用的色调暗淡的画法，将人物形象从阴影中突出，突破了传统绘画的明显特征，预示着文艺复兴的到来。
强盛时期的创作
在教会的邀请下绘制祭坛画《岩间圣母》。这幅画现在藏在卢浮宫里。“之后的晚餐”是他这个时期创作的最有名的作品。表现了耶稣被逮捕前和徒弟们之后聚餐后诀别的场面的湿壁画描绘在米兰的格列奇修道院食堂的墙壁上。其巧妙的构图和独创的布局将画面上的大厅和生活中的食堂的建筑结构紧密结合，让观众感受到画中的情景正在眼前发生。
在人物配置上，耶稣从画面中央独立出来，其他徒弟通过各自不同的表情和手势，表现出惊异、愤怒、怀疑、剖白、慌乱的感情。这种典型性格的描写，突出了绘画的主题，与构图的统一效果相辅相成，堪称美术史上完美的范本。
15世纪末，为米兰公爵卢德维科·斯福尔萨的切切里亚·加利拉尼创作了《怀抱银鼠的女人》。《怀抱银鼠的女人》是达芬奇杰出的肖像画作品，体现了深刻的写实力。这幅美丽的肖像画充分体现了达芬奇的绘画技术，人物气质高贵而安静，女郎所抱的白貂毛色光润、生动、充满活力，但形态真实的白貂却使画面生动。
这幅肖像画最引人注目的地方是明暗处理，画家用光和影衬托出了切蒂利亚优雅的头盖和柔和的脸。形神兼备，这幅肖像画受到世人的尊敬。

1500年，达芬奇回到佛罗伦萨，随着共和国制度的恢复，文化氛围一时活跃，画坛上也相继出现了米开朗基罗、拉斐尔等杰出人物。达芬奇开始为兰则塔大教堂的主祭坛创作《圣母与圣安娜、圣约翰》，展示了市民精心构思的《圣母与圣安娜、圣约翰》的写生，随即引起骚动，其构图原理和画法对艺术界产生了巨大影响，米开朗基罗和拉斐尔等人也受到启发。
1503年，他一边画着市的壁画《Angel之战》，一边创作了《蒙娜丽莎》和《圣母与圣安娜、圣约翰》（之后是《圣母与圣安娜》），这两幅画和《洗礼者圣约翰》一起成为了他的极其珍贵的作品，始终带到身边，晚年移居法国也不受左右之后留在了巴黎。1499年，为了避免战乱，达芬奇去曼图亚和威尼斯等地旅行，进行科学研究。
巨人长眠
达芬奇晚年被法国国王弗朗索瓦一世邀请到法国，弗朗索瓦一世给予他至高的接待，安放在安布华斯城中的克鲁克斯庄园，时不时地向他请教。1519年5月2日，高龄的达芬奇因病去世，在赶来的佛朗索瓦一世的怀里咽下了之后的一口气。他最喜欢的学生弗朗西斯科·梅尔斯（达芬奇死前把所有的绘画作品和大量的原稿托付给他）说：“达芬奇的死，对每个人都是损失，造物主没有能力创造像他那样的天才。”。
“天有时美，有时优雅，有时能赋予一个人才能，他的所作所为都是出类拔萃的，表明他的天才不是人类的力量，而是从天上来的。莱昂纳多正是如此。他的优雅和优美是无与伦比的，他的智慧之高可以把所有难题迎向刀剑而解。”。这是对文艺复兴时期传记作家瓦莎莉达芬奇的赞美之词。

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